Il giovane studente Peter Parker (Tobey Maguire) durante un visita in un laboratorio scientifico viene morso da un ragno radioattivo fuggito da una teca, il morso gli donerà poteri straordinari che risulterano una commistione di instinto d’insetto, agilità e forza sovrumana, nonchè l’intrigante modifica genetica tipica degli aracnidi, che gli permetterà al suo corpo di produrre ragnatele.
In principio Parker, che orfano vive con i suoi zii, prenderà sottogamba la responsabilità che comporta il suo nuovo dono, una leggerezza che costerà la vita allo zio e lo farà cadere in una profonda crisi, che sfocierà in una nuova e più alta missione, proteggere i cittadini inermi di New York dall’imperante criminalità.
Cosi Peter Parker, segretamente innamorato della bella Mary Jane (Kirsten Dunst) a sua volta fidanzata con il suo migliore amico, il ricco rampollo Harry Osborn (James Franco), comincerà ad utilizzare i suoi poteri nella giusta direzione, ma questo attirerà inevitabilmente l’attenzione di un super-criminale anch’egli geneticamente modificato, il folle Goblin (Willem Dafoe), che minaccerà la famiglia del neo-supereroe sfidandolo ad una mortale resa dei conti.
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